磷酸吡哆醛依賴型天冬氨酸α-脫羧酶的研究
關(guān)鍵詞：磷酸吡哆醛 酶學(xué)性質(zhì) 詹氏甲烷球菌
摘要：β-丙氨酸作為一種重要的平臺(tái)化合物,是合成含氮化合物的前體。相較于化學(xué)合成法,人們更傾向于利用L-天冬氨酸-α脫羧酶(ADC)環(huán)保地制備β-丙氨酸。由于細(xì)菌來(lái)源的ADC存在嚴(yán)重的機(jī)理性底物失活,限制了其在工業(yè)上的應(yīng)用。實(shí)驗(yàn)在大腸桿菌中表達(dá)了3種古細(xì)菌來(lái)源的ADC,純化和測(cè)定了其對(duì)于L-天冬氨酸的脫羧活性。考察了來(lái)源于詹氏甲烷球菌的重組酶(ADCM.j)的酶學(xué)性質(zhì)和輔酶磷酸吡哆醛的穩(wěn)定性,進(jìn)行了酶轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)。重組酶ADCM.j的比酶活為6.87U/mg,最適溫度和pH分別為80℃和8.0,具有很強(qiáng)的熱穩(wěn)定性,適合用于工業(yè)生產(chǎn)。這類(lèi)磷酸吡哆醛依賴型ADC,酶催化中沒(méi)有基于機(jī)理的底物失活作用,但其輔酶的穩(wěn)定性和循環(huán)利用是其酶催化中的主要限制因素。
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