三氟拉嗪與八肋游仆蟲中心蛋白N端半分子的結(jié)合及對(duì)蛋白功能的影響
關(guān)鍵詞：三氟拉嗪 光譜分析
摘要：采用熒光光譜、圓二色光譜(CD)、等溫滴定量熱分析(ITC)、電泳及分子對(duì)接等分析技術(shù),研究了三氟拉嗪(TFP)與八肋游仆蟲中心蛋白N端半分子(apoN-EoCen)的結(jié)合,考察了TFP對(duì)apoN-EoCen性質(zhì)的影響.結(jié)果表明,在室溫下10 mmol/L Hepes緩沖溶液(pH=7.4)中,TFP與apoN-EoCen以摩爾比1∶1結(jié)合于apoN-EoCen的第二個(gè)EF-手的E,F螺旋之間,條件結(jié)合常數(shù)約為10^3L/mol;TFP的結(jié)合導(dǎo)致蛋白質(zhì)二級(jí)結(jié)構(gòu)發(fā)生改變,α螺旋含量減小,Tb^3+敏化熒光強(qiáng)度降低83%,apoN-EoCen切割DNA的類核酸酶活性明顯受到抑制;Tb^3+仍可占據(jù)復(fù)合物apoN-EoCen-TFP中蛋白質(zhì)的2個(gè)金屬離子結(jié)合位置,條件結(jié)合常數(shù)約為7.0×10^5L/mol,TFP的結(jié)合不抑制金屬離子誘導(dǎo)的蛋白質(zhì)聚集.
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