日本血吸蟲尾蚴及童蟲可溶性抗原蛋白質(zhì)組研究
關鍵詞：血吸蟲 日本 抗原 蛋白質(zhì)組
摘要：目的應用免疫蛋白質(zhì)組研究方法篩選、鑒定日本血吸蟲尾蚴、童蟲可溶性抗原蛋白質(zhì)。方法日本血吸蟲尾蚴可溶性粗抗原（scAP）、童蟲可溶性粗抗原（SLAP）分別用雙向凝膠電泳（2-DE）分離蛋白質(zhì)，每樣本同時制3塊膠，1塊膠進行銀染，2塊膠通過電轉(zhuǎn)印后再分別用感染兔和正常兔血清作Western印跡分析，確定特異性陽性反應點，再從相應銀染膠圖上找到匹配的抗原蛋白質(zhì)點；用MALDI．TOWTOF串聯(lián)質(zhì)譜鑒定抗原蛋白質(zhì)。結(jié)果SCAP、SLAP與感染兔血清免疫反應分別獲得94個和68個陽性點，在相應的銀染膠圖上分別獲得33個和31個匹配蛋白質(zhì)點；用MALDI．TOF／TOF串聯(lián)質(zhì)譜鑒定和NCBI數(shù)據(jù)庫檢索，鑒定成功率分別為100．O％（20／20）和68．2％（15／22）。已獲鑒定的SCAP抗原中蛋白酶占62．5％（10／16），SLAP抗原中蛋白酶占36．4％（4／11）；2個抗原蛋白為SCAP和SLAP共有。結(jié)論2-DE能有效地分離日本血吸蟲可溶性抗原蛋白質(zhì)，2-DWestern印跡法能較好地篩選特異性抗原；2-DWestern印跡法陽性點與2-DE膠圖蛋白質(zhì)點匹配率低，低豐度的抗原蛋白質(zhì)易被漏檢；尾蚴和童蟲的抗原蛋白質(zhì)組差異較大。
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