血管內(nèi)皮生長因子定量檢測試劑盒的研制
李樹香 王欣怡 劉敬 周亞 徐靜 鄒檢平 北京生物制品研究所第三研究室 100024 河南大學藥學院 開封475001 北京健平九星生物醫(yī)藥科技有限公司 100085
關鍵詞：血管內(nèi)皮生長因子類 試劑盒 抗體 單克隆
摘要：目的 研制血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor,VEGF）檢測試劑盒（酶標法）.方法 以一株特異性抗VEGF單克隆抗體作為捕獲抗體,另一株單克隆抗體作為檢測抗體,通過棋盤滴定法確定兩抗體的最佳濃度組合.制備凍干VEGF165參考品,并對樣本稀釋液、封閉液等實驗條件進行優(yōu)化.檢測自制試劑盒的特異性并對其進行初步應用.結果 棋盤滴定法確定捕獲抗體的質(zhì)量濃度為10μg/ml,檢測抗體的稀釋倍數(shù)為1：20 000.凍干VEGF165的質(zhì)量濃度為720～880 pg/ml,樣本間變異系數(shù)〈10%.以5%牛血清白蛋白作為封閉液和樣本稀釋液最為合適.自制試劑盒與10種細胞因子均無交叉反應,具有較高的特異性和靈敏度.結論 成功研制出VEGF檢測試劑盒.
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