苯胺藍比色法測定凝膠多糖含量的研究
李文強; 汪其林; 楊海波; 朱萍; 梁海秋; 周河治; 楊輝 廣西大學生命科學與技術(shù)學院
關(guān)鍵詞：苯胺藍 凝膠多糖 特異性 標準曲線
摘要：利用苯胺藍與凝膠多糖的β-1,3-D糖苷鍵特異性結(jié)合的原理,建立苯胺藍比色法快速特異性測定凝膠多糖含量的方法。優(yōu)化測定方法的樣品制備、反應(yīng)體系、溫度和測定條件,比較分析各種多糖對測定結(jié)果的影響。將市售凝膠多糖標品溶液與苯胺藍在堿性條件下35℃水浴30min,測定OD550值,得到R2=0.99788的標準曲線,檢測濃度為0.05%-0.1%。從發(fā)酵液中提取凝膠多糖制作標準曲線,測定發(fā)酵液中凝膠多糖含量,與提取稱重法比較其平均相對誤差為4.98%。該方法克服目前常用的苯酚硫酸法、剛果紅顯色法測定凝膠多糖特異性差的缺點,又比提取稱重法簡單快速,對于跟蹤發(fā)酵過程中凝膠多糖產(chǎn)量變化趨勢進而更好地進行過程控制有很重要的意義。
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