PadR對須糖多孢菌丁烯基多殺菌素生物合成及轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白表達(dá)的影響
關(guān)鍵詞：須糖多孢菌 padr 轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子 轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白 丁烯基多殺菌素
摘要：為研究padR基因表達(dá)對須糖多孢菌(Saccharopolyspora pogona)次級代謝產(chǎn)物生物合成及相關(guān)蛋白表達(dá)的影響,在對須糖多孢菌基因組測序結(jié)果的基礎(chǔ)上,從基因組中克隆了padR基因上、下游同源臂,利用融合PCR將硫鏈絲菌素抗性基因插入上、下游同源臂之間,將融合片段與穿梭載體pOJ260連接,構(gòu)建敲除載體pOJ260-UHA-tsr-DHA。通過接合轉(zhuǎn)移將其導(dǎo)入野生型須糖多孢菌中,通過同源臂雙交換獲得須糖多孢菌敲除菌株S.pogona-ΔpadR。經(jīng)HPLC檢測分析,敲除菌株次級代謝產(chǎn)物丁烯基多殺菌素產(chǎn)量與原始菌株相比提高了27.3%,且有7個(gè)轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白出現(xiàn)表達(dá)上調(diào)。這一研究表明padR基因的敲除能夠有效促進(jìn)須糖多孢菌丁烯基多殺菌素的生物合成。該研究對優(yōu)化須糖多孢菌丁烯基多殺菌素的生物合成途徑具有一定的指導(dǎo)意義,為研究padR基因表達(dá)在鏈霉菌次級代謝產(chǎn)物合成中的作用打下了基礎(chǔ)。
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