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          基于熒光素酶報告基因的細(xì)菌外膜囊泡標(biāo)記方法的建立

          劉暢; 李楚楚; 李智洋 南京鼓樓醫(yī)院檢驗科; 南京210008; 江蘇省疾病預(yù)防控制中心急性傳染病防制所; 南京210009

          關(guān)鍵詞:細(xì)菌外膜囊泡 外膜蛋白 熒光素酶 

          摘要:目的建立一種基于熒光素酶報告基因的細(xì)菌外膜囊泡標(biāo)記方法。方法利用細(xì)菌外膜囊泡表面攜帶高豐度細(xì)菌外膜蛋白A(OmpA)的特點,構(gòu)建OmpA-NanoLuc熒光素酶融合蛋白,根據(jù)熒光素酶活性評估樣品中的細(xì)菌外膜囊泡數(shù)量。結(jié)果成功構(gòu)建OmpA-NanoLuc融合蛋白表達(dá)載體,受試菌株在表達(dá)該融合蛋白后所分泌的外膜囊泡具有穩(wěn)定的熒光素酶活性??赏ㄟ^檢測熒光素酶活性的方式對細(xì)菌外膜囊泡進(jìn)行半定量檢測。結(jié)論建立了一種基于熒光素酶標(biāo)記的細(xì)菌外膜囊泡半定量檢測方法,可用于評估特定菌株的細(xì)胞外膜囊泡分泌水平。

          臨床檢驗雜志要求:

          {1}基金資助,在論文首頁下方,以腳注注明基金類別和項目編號。

          {2}來稿要求選題新穎、觀點鮮明、資料準(zhǔn)確、說服力強,具有一定的學(xué)術(shù)交流價值。

          {3}中文標(biāo)題:簡明確切地反映文章內(nèi)容,不超過25字。

          {4}參考文獻(xiàn):依照其在文中出現(xiàn)的先后順序用阿拉伯?dāng)?shù)字標(biāo)出。

          {5}關(guān)鍵詞應(yīng)為3-5個,最好體現(xiàn)出文章的主旨和特色,目的是方便讀者根據(jù)關(guān)鍵詞在眾多文獻(xiàn)中關(guān)注到您的研究。

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          臨床檢驗

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