關(guān)鍵詞:水稻 耐儲(chǔ)性 轉(zhuǎn)基因 rna干擾技術(shù) 脂氧合酶
摘要:[目的]本文旨在通過RNAi技術(shù)下調(diào)OsLOX提高水稻種子耐儲(chǔ)性,增強(qiáng)其在老化處理后的種子活力。[方法]利用RNA干擾(RNAi)技術(shù),下調(diào)水稻品種‘寧粳1號(hào)’脂氧合酶基因(LOX)的表達(dá),對轉(zhuǎn)基因后代進(jìn)行多年分子鑒定及生理生化特征和農(nóng)藝性狀考察。[結(jié)果]獲得了穩(wěn)定含有目的片段且不含潮霉素基因的2個(gè)改良家系XO3和XO6,與‘寧粳1號(hào)’相比,改良系中OsLOX2和OsLOX3表達(dá)量顯著降低;經(jīng)10個(gè)月自然放置和7 d人工老化處理,改良系脂氧合酶和丙二醛含量均顯著低于受體親本‘寧粳1號(hào)’,其脂氧合酶含量為0.094~0.111 ng·mL-1、丙二醛含量低于4 nmol·mg^-1,而‘寧粳1號(hào)’分別為0.115 ng·mL-1和6 nmol·mg^-1;老化后‘寧粳1號(hào)’發(fā)芽率只有31%,而改良系發(fā)芽率在70%以上;TTC染色后還原得到的2,3,5-三苯基四唑氯化物(TTCH)含量和發(fā)芽速率也表明改良系的種子活力顯著提高;老化后,改良系的種子淀粉含量和膠稠度變化幅度小于‘寧粳1號(hào)’。此外,改良系的分蘗數(shù)和有效穗數(shù)明顯增加但結(jié)實(shí)率降低。[結(jié)論]通過RNA干擾技術(shù)降低‘寧粳1號(hào)’中OsLOX2和OsLOX3基因的表達(dá),提高了‘寧粳1號(hào)’的耐儲(chǔ)性,為耐儲(chǔ)藏水稻分子育種提供材料基礎(chǔ)。
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