高壓氧通過(guò)上調(diào)Cystatin C增強(qiáng)胚胎大鼠皮層神經(jīng)元對(duì)氧糖剝奪的耐受
關(guān)鍵詞：高壓氧預(yù)處理 胱抑素c 自噬 皮層原代神經(jīng)元 氧糖剝奪
摘要：目的:探討胱抑素C(Cys C)在高壓氧(HBO)促進(jìn)胚胎大鼠皮層原代神經(jīng)元對(duì)糖氧剝奪(OGD)耐受過(guò)程中的作用。方法:取孕18 d SD大鼠胎鼠大腦皮質(zhì)進(jìn)行原代神經(jīng)元培養(yǎng)。實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組(control)、OGD組(OGD)、HBO預(yù)處理組(HBO+OGD)、Cys C處理組(Cys C+OGD)和siRNA處理組(Cys C-siRNA+OGD),于培養(yǎng)后第10 d給予HBO預(yù)處理24 h,制備氧糖剝奪(OGD)模型,向細(xì)胞培養(yǎng)液中補(bǔ)充外源性Cys C或特異性siRNA來(lái)增加或下調(diào)神經(jīng)元中Cys C水平,利用乳酸脫氫酶(LDH)檢測(cè)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞死亡。采用Western Blot的方法檢測(cè)各組細(xì)胞內(nèi)自噬相關(guān)蛋白LC3-II和Beclin-1的表達(dá)。結(jié)果:HBO預(yù)處理可減輕大鼠皮層原代神經(jīng)元OGD后的細(xì)胞死亡,同時(shí)上調(diào)Cys C、LC3-II及Beclin-1的表達(dá)。Cys C-siRNA能夠顯著抑制HBO預(yù)處理對(duì)神經(jīng)元的保護(hù)作用,并抑制LC3-II及Beclin-1的表達(dá);外源性Cys C具有與Cys C-siRNA相反的作用。結(jié)論:Cys C是HBO預(yù)處理誘導(dǎo)神經(jīng)保護(hù)效應(yīng)的重要分子,其內(nèi)在機(jī)制可能為HBO預(yù)處理可通過(guò)促進(jìn)Cys C表達(dá),上調(diào)LC3-II及Beclin-1的表達(dá),減輕神經(jīng)損傷。
神經(jīng)解剖學(xué)雜志要求:
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