增強(qiáng)回補(bǔ)途徑對谷氨酸棒狀桿菌合成L-異亮氨酸的影響
關(guān)鍵詞：谷氨酸棒狀桿菌 回補(bǔ)途徑 代謝工程
摘要：該實(shí)驗(yàn)考察和比較增強(qiáng)回補(bǔ)途徑對谷氨酸棒狀桿菌合成L-異亮氨酸的影響。通過以L-異亮氨酸生產(chǎn)菌Corynebacterium glutamicum YI為出發(fā)菌株,分別采用基因組整合和質(zhì)粒的方式過表達(dá)磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶編碼基因ppc及丙酮酸羧化酶編碼基因pyc。結(jié)果表明,獲得pyc基因組整合和質(zhì)粒過表達(dá)菌株ILE01和ILE02,搖瓶條件下菌株L-異亮氨酸產(chǎn)量分別提高17.3%(6.1 g/L)和9.6%(5.7 g/L)、發(fā)酵罐條件下分別提高11.7%(24.8 g/L)和8.1%(24.0 g/L)。獲得ppc基因組整合和質(zhì)粒過表達(dá)菌株ILE03和ILE04,搖瓶條件下菌株L-異亮氨酸產(chǎn)量分別提高30.8%(6.8 g/L)和13.5%(5.9 g/L)、發(fā)酵罐條件下分別提高15.8%(25.7 g/L)和9.5%(24.3 g/L)。此外,過表達(dá)pyc和ppc還可不同程度地提高L-異亮氨酸轉(zhuǎn)化率。然而采用質(zhì)粒過表達(dá)pyc和ppc均使得菌株生物量下降。因此,過表達(dá)pyc和ppc均能顯著提高L-異亮氨酸產(chǎn)量和轉(zhuǎn)化率,基因組整合的過表達(dá)方式效果優(yōu)于質(zhì)粒過表達(dá)。該研究首次比較并報(bào)道了增強(qiáng)谷氨酸棒桿菌回補(bǔ)途徑對谷氨酸棒桿菌生產(chǎn)L-異亮氨酸的影響,可為其代謝工程改造提供參考。
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