酶高效表達體系構(gòu)建及高通量篩選關(guān)鍵技術(shù)
關(guān)鍵詞：酶分子高效表達 菌株構(gòu)建 高通量篩選技術(shù)
摘要：酶作為生物催化劑已被廣泛地應(yīng)用于醫(yī)藥、食品、化工、能源及輕工業(yè)等領(lǐng)域,隨著低碳經(jīng)濟發(fā)展及綠色制造的發(fā)展需求,酶制劑應(yīng)用領(lǐng)域不斷拓展。隨著當今生命科學(xué)前沿技術(shù)飛速發(fā)展,生物信息學(xué)、分子進化、基因組學(xué)和蛋白質(zhì)組學(xué)等先進技術(shù)被應(yīng)用于新酶分子的挖掘與改造。而代謝工程及反應(yīng)過程工程成為酶制劑發(fā)酵生產(chǎn)調(diào)控的關(guān)鍵。同時,酶制劑高效表達菌株及其高通量篩選技術(shù)平臺的構(gòu)建也是新酶發(fā)現(xiàn)與工業(yè)化生產(chǎn)的重要橋梁。本文從酶高效表達載體和宿主出發(fā),重點介紹了高效表達體系的構(gòu)建原理和方法,包括重組酶表達載體表達元件的優(yōu)化、重組酶基因表達量的增加、提高酶蛋白質(zhì)的折疊通量、優(yōu)化蛋白分泌運輸途徑、降低蛋白降解途徑的作用、初級代謝途徑的優(yōu)化等。還總結(jié)了高效菌株的篩選方法,并展開合理預(yù)測。
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