關(guān)鍵詞:歐美楊111 農(nóng)桿菌介導(dǎo)法 遺傳轉(zhuǎn)化 山葡萄 cbf3基因
摘要:以歐美楊111為受體材料,利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤(pán)法進(jìn)行了山葡萄VaCBF3基因的遺傳轉(zhuǎn)化,分析了預(yù)培養(yǎng)時(shí)間、菌液濃度、侵染時(shí)間、共培養(yǎng)時(shí)間對(duì)轉(zhuǎn)化效率的影響,并對(duì)獲得抗性植株進(jìn)行PCR檢測(cè)。結(jié)果表明:歐美楊111遺傳轉(zhuǎn)化過(guò)程中適宜的預(yù)培養(yǎng)時(shí)間為3 d,適宜菌液濃度為OD600為0.3~0.4,適宜侵染時(shí)間為2~4 min,適宜共培養(yǎng)時(shí)間為3 d。經(jīng)過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)化子的PCR鑒定,獲得4株陽(yáng)性轉(zhuǎn)基因植株,初步說(shuō)明外源山葡萄CBF3基因已導(dǎo)入至歐美楊111號(hào)中,轉(zhuǎn)化體系已成功建立。
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