CHAC1基因沉默SU-DHL-8細(xì)胞株的構(gòu)建及其對(duì)青蒿素細(xì)胞毒活性的影響
關(guān)鍵詞：彌散性大b細(xì)胞淋巴瘤 青蒿素 chac1 轉(zhuǎn)染 基因沉默
摘要：應(yīng)用慢病毒短發(fā)夾RNA(short hairpin RNA,shRNA)轉(zhuǎn)染的方式構(gòu)建了陽離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白樣蛋白1(cation transport regulator-like protein 1,CHAC1)基因沉默SU-DHL-8細(xì)胞株模型,用于研究CHAC1基因?qū)η噍锼丶?xì)胞毒活性的影響.研究了青蒿素對(duì)彌散性大B細(xì)胞淋巴瘤SU-DHL-8細(xì)胞增殖的抑制作用及作用后CHAC 1基因及蛋白的表達(dá)情況.應(yīng)用小干擾RNA(small interfering RNA,siRNA)沉默SU-DHL-8細(xì)胞株內(nèi)的CHAC1基因.采用慢病毒轉(zhuǎn)染的方法構(gòu)建CHAC1基因沉默的SU-DHL-8細(xì)胞株.采用實(shí)時(shí)熒光定量核酸擴(kuò)增檢測(cè)系統(tǒng)(real-time quantitative PCR detecting system,qPCR)、3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴鹽(3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromide,MTT)活性測(cè)定法和蛋白免疫印跡(Westen blot)的方法檢測(cè)沉默效果以及CHAC1基因?qū)η噍锼丶?xì)胞毒活性的影響.成功構(gòu)建了穩(wěn)定沉默CHAC1基因的穩(wěn)轉(zhuǎn)細(xì)胞株,并初步探討了CHAC1基因?qū)η噍锼匾种茝浬⑿源驜細(xì)胞淋巴瘤SU-DHL-8細(xì)胞增殖的影響.
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