日本結縷草ZjNOL基因的克隆及轉錄自激活檢測
董笛; 張宇昕; 劉暢; 王煥英; 李殷睿智; 劉卓成; 王夢迪; 晁躍輝; 韓烈保 北京林業(yè)大學草業(yè)與草原學院; 北京100038; 包頭市環(huán)境保護局昆區(qū)分局; 內蒙古包頭市014000
關鍵詞：日本結縷草 nol基因 轉錄自激活 生物信息學
摘要：NYC1-like(NOL)編碼的短鏈氧化還原酶是葉綠素b降解的必需酶。對日本結縷草(Zoysia japonica)ZjNOL基因全長克隆結果顯示,該基因開放閱讀框為981個核苷酸,編碼327個氨基酸。生物學分析顯示,ZjNOL蛋白與高粱(Sorghum bicolor)中的NOL蛋白的親緣關系最近。利用pGBKT7載體,通過DNA重組技術成功構建pGBKT7-ZjNOL酵母表達載體,通過PEG介導的轉化方法,成功導入Y2HGold酵母中,自激活檢測顯示含有pGBKT7-ZjNOL的Y2HGold酵母細胞能夠在SD/-Trp培養(yǎng)基上正常生長,而在SD/-Trp/AbA培養(yǎng)基上不能生長,也不能在含有X-α-Gal培養(yǎng)基顯藍色,證明ZjNOL蛋白沒有自激活活性。生物信息學分析及轉錄自激活檢測有助于深入研究ZjNOL基因功能,為延長結縷草綠期,改善結縷草坪用質量奠定基礎。
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