綿羊MAVS基因的原核表達(dá)及多克隆抗體的制備
董丹丹; 劉騰; 繆秋紅; 朱杰; 劉光清 中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院上海獸醫(yī)研究所; 上海200241
關(guān)鍵詞：mavs基因 原核表達(dá) 多克隆抗體
摘要：通過RT-PCR方法從綿羊肺細(xì)胞(sheep lung cells,SLT)擴增獲得MAVS(mitochondrial antiviral signaling protein)基因,并將其克隆至原核表達(dá)載體pET-32a,測序鑒定結(jié)果表明成功獲得重組質(zhì)粒pET-32a-MAVS。將其轉(zhuǎn)化至感受肽細(xì)胞BL21中,經(jīng)IPTG誘導(dǎo)獲得重組蛋白。將純化的MAVS蛋白免疫BALB/c雌鼠,制備抗MAVS的鼠源多克隆抗體。SDS-PAGE結(jié)果表明該抗體具有良好的反應(yīng)原性。MAVS多克隆抗體的成功制備為其生物學(xué)功能研究奠定了基礎(chǔ)。
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