黃熱病毒可視化RT-LAMP檢測(cè)方法的建立
關(guān)鍵詞：黃熱病毒 環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增 等溫?cái)U(kuò)增
摘要：目的建立一種根據(jù)顏色變化判斷結(jié)果的黃熱病毒可視化RT-LAMP快速核酸檢測(cè)方法。方法針對(duì)112株目前GeneBank上所有基因亞型黃熱病毒株的5’端非編碼區(qū)保守性核苷酸序列,設(shè)計(jì)黃熱病毒特異性LAMP引物,建立黃熱病毒可視化RT-LAMP檢測(cè)方法。評(píng)價(jià)該方法的特異性、靈敏性,并用臨床樣本和模擬樣本進(jìn)行應(yīng)用性驗(yàn)證。結(jié)果建立的RT-LAMP方法有較高的特異性,與登革病毒、裂谷熱病毒、西尼羅病毒、乙腦病毒及基孔肯雅病毒無(wú)交叉反應(yīng);用體外轉(zhuǎn)錄的RNA模板評(píng)估,其靈敏性可達(dá)102拷貝/μl;用口岸發(fā)熱病例血清樣本驗(yàn)證,該方法可檢出血清中的黃熱病毒。結(jié)論建立的黃熱病毒可視化RT-LAMP檢測(cè)方法操作簡(jiǎn)便、快速、特異性好,可應(yīng)用于黃熱病毒的現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。
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