早熟棉‘中棉所16’再生純合系的創(chuàng)制及遺傳轉(zhuǎn)化
關(guān)鍵詞：早熟棉 2 胚胎發(fā)生 再生純合系 遺傳轉(zhuǎn)化
摘要：為拓展可再生陸地棉的基因型,利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)直接改良已有的優(yōu)良早熟棉品種,設(shè)置不同濃度的2,4-D和激動(dòng)素(KT)4種組合進(jìn)行誘導(dǎo),成功獲得體細(xì)胞胚和再生植株,構(gòu)建早熟棉品種‘中棉所16’再生體系。研究表明:誘導(dǎo)初生愈傷組織以添加0.1 mg/L 2,4-D、0.1 mg/L KT的組合誘導(dǎo)培養(yǎng)基效果最佳,愈傷組織形態(tài)較好,有利于撤除激素的胚胎發(fā)生和植株再生;‘中棉所16’胚胎發(fā)生狀態(tài)只有1種,在去掉2,4-D和KT的第一次繼代便開(kāi)始分化出白-灰色粗顆粒胚性愈傷組織,繼代1~2次后有胚狀體出現(xiàn)和植株再生,整個(gè)再生過(guò)程需要6~8個(gè)月。經(jīng)過(guò)2次組培獲得再生系,其不同株系胚胎發(fā)生率均有不同程度的明顯提高。隨后獲得后代種子100%可再生純合系材料,經(jīng)過(guò)進(jìn)一步自交擴(kuò)繁,其后代種子用于轉(zhuǎn)化受體,提高了轉(zhuǎn)化和再生效率,并利用該體系將EDT1基因成功導(dǎo)入‘中棉所16’基因組。以9個(gè)月為限統(tǒng)計(jì),其遺傳轉(zhuǎn)化胚胎發(fā)生率高達(dá)40%以上。
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