樹(shù)鼩PSEN1全長(zhǎng)編碼序列的克隆及分子特征分析
關(guān)鍵詞：樹(shù)鼩 psen1 分子克隆 系統(tǒng)發(fā)育分析
摘要：目的 獲取樹(shù)鼩早老素蛋白-1(PSEN1)的全長(zhǎng)編碼序列并進(jìn)行分子特征分析。方法 以樹(shù)鼩腦組織總RNA為材料,通過(guò)RT-PCR、RACE-PCR擴(kuò)增和序列拼接獲得PSEN1基因全長(zhǎng)編碼序列,進(jìn)而通過(guò)DNAMAN、MEGA等生物信息學(xué)軟件對(duì)其序列和分子特征進(jìn)行分析。qRT-PCR和Western Blot進(jìn)一步分析PSEN1在樹(shù)鼩各個(gè)組織的表達(dá)模式。結(jié)果 克隆鑒定了樹(shù)鼩PSEN1基因,其cDNA的開(kāi)放閱讀框全長(zhǎng)1128 bp,編碼375個(gè)氨基酸。通過(guò)系統(tǒng)發(fā)育譜系樹(shù)、氨基酸序列對(duì)比分析,發(fā)現(xiàn)樹(shù)鼩PSEN1與小鼠、大鼠等相比更接近人類(lèi)和非人靈長(zhǎng)類(lèi)動(dòng)物。qRT-PCR和Western Blot的結(jié)果表明,樹(shù)鼩PSEN1在腦組織的表達(dá)量明顯高于其他臟器組織。結(jié)論 通過(guò)克隆樹(shù)鼩PSEN1基因序列并進(jìn)行分析,為今后進(jìn)一步深入研究該基因功能和建立相關(guān)疾病動(dòng)物模型提供理論基礎(chǔ)。
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