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關(guān)鍵詞：人脂肪干細(xì)胞 外泌體 細(xì)胞外分泌物質(zhì) 肝纖維化 肝星狀細(xì)胞 

摘要：背景:肝纖維化具有較高的發(fā)病率和死亡率,肝星狀細(xì)胞的活化和增殖是肝纖維化進(jìn)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。目前還沒(méi)有針對(duì)單一環(huán)節(jié)或靶點(diǎn)的有效抗纖維化藥物。目的:分析人脂肪干細(xì)胞來(lái)源外泌體對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的大鼠肝纖維化的影響。方法:①通過(guò)酶溶解法獲取健康人群來(lái)源脂肪中干細(xì)胞,體外培養(yǎng)獲取一定數(shù)量細(xì)胞后通過(guò)多重超濾法獲取外泌體。體外培養(yǎng)的肝星狀細(xì)胞經(jīng)轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1活化后利用不同濃度外泌體進(jìn)行處理,通過(guò)定量PCR檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)α-平滑肌動(dòng)蛋白的表達(dá)明確其活化程度,以及分別使用CCK-8及流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)各組外泌體處理后活化肝星狀細(xì)胞的生長(zhǎng)率及凋亡率。②通過(guò)腹腔注射四氯化碳構(gòu)建肝纖維化大鼠動(dòng)物模型,尾靜脈注射外泌體進(jìn)行治療。檢測(cè)各組動(dòng)物的肝功能及血清Ⅲ型前膠原、Ⅳ型膠原,肝組織Ishak評(píng)分及肝纖維化半定量,以及通過(guò)免疫熒光法檢測(cè)肝組織內(nèi)基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑1、基質(zhì)金屬蛋白酶9及α-平滑肌動(dòng)蛋白的表達(dá)。實(shí)驗(yàn)方案于2017年1月經(jīng)同濟(jì)大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)倫理委員會(huì)以及醫(yī)學(xué)倫理學(xué)委員會(huì)批準(zhǔn)。結(jié)果與結(jié)論:人脂肪干細(xì)胞來(lái)源外泌體可抑制活化的肝星狀細(xì)胞增殖,其可能的機(jī)制為抑制活化巨噬細(xì)胞的增殖,減少膠原纖維、α-平滑肌動(dòng)蛋白及基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑1的表達(dá),并促進(jìn)基質(zhì)金屬蛋白酶9的表達(dá)。提示外泌體可治療四氯化碳誘導(dǎo)肝纖維化。

中國(guó)組織工程研究雜志要求:

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