乙型肝炎病毒C區(qū)基因多態(tài)性的檢測(cè)分析
關(guān)鍵詞：肝炎病毒 乙型 基因 聚合酶鏈反應(yīng)
摘要：目的 探討乙型肝炎患者和健康攜帶者乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）C區(qū)基因變異規(guī)律及其臨床意義。方法采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)乙肝患者和HBV健康攜帶者外周血HBV DNA載量；PCR結(jié)合DNA測(cè)序?qū)BV C區(qū)基因進(jìn)行多態(tài)性檢測(cè)，并應(yīng)用DNAstar軟件進(jìn)行比對(duì)和分析。結(jié)果①與標(biāo)準(zhǔn)株相比，所有標(biāo)本C區(qū)基因序列均出現(xiàn)變異。在≥2例標(biāo)本中出現(xiàn)的突變31處，包括PreC基因3處，C基因28處；其中9處為錯(cuò)義突變，1處為終止突變，其余21處均為同義突變。nt 1827 c→a和nt 2221 c→t出現(xiàn)在所有標(biāo)本，有6處同義突變出現(xiàn)于較多標(biāo)本中。4例乙肝患者標(biāo)本在nt1896位發(fā)生g→a突變，另有4例乙肝患者在HBcAgCTL識(shí)別表位84～101處發(fā)生2處突變即S87G和I97F或197L。②DNA擴(kuò)增及測(cè)序的成功與否與HBV的DNA拷貝數(shù)密切相關(guān)，本次研究DNA擴(kuò)增及測(cè)序成功的標(biāo)本其DNA拷貝數(shù)多大于40 193/ml,DNA拷貝數(shù)較低的標(biāo)本不易獲得成功。結(jié)論HBV基因組極易發(fā)生突變，C區(qū)基因有2個(gè)位點(diǎn)的突變見于所有擴(kuò)增成功標(biāo)本，為此研究標(biāo)本所特有，提示這些突變熱點(diǎn)可能具有地域特異性。C區(qū)基因變異可引起HBeAg和HBcAg的結(jié)構(gòu)及功能改變，進(jìn)而導(dǎo)致病毒逃逸機(jī)體對(duì)病毒的免疫清除作用，或影響HBeAg的檢出。
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