薄荷檸檬烯-6-羥化酶基因(MhL60H)的克隆與表達分析
關鍵詞：薄荷 基因克隆 生物信息學分析 組織表達特性 原核表達分析
摘要：從薄荷(Mentha haplocalyx Briq.)葉cDNA中克隆到1個參與精油合成的檸檬烯-6-羥化酶基因,命名為MhL6OH,編碼的蛋白質(zhì)為MhL6OH。序列分析結果表明:該基因蛋白質(zhì)編碼區(qū)(CDS)全長1 479 bp,編碼492個氨基酸殘基;MhL6OH蛋白的理論相對分子質(zhì)量為55 855.69,理論等電點為pI 8.71,其二級結構中α-螺旋、無規(guī)則卷曲、延伸鏈和β-轉角的比例分別為51.02%、30.49%、12.40%和6.10%,且該蛋白質(zhì)含有保守的細胞色素P450結構域,說明薄荷MhL6OH蛋白屬于CYP71家族的D亞家族。多重序列比對結果表明:薄荷MhL6OH蛋白與椒樣薄荷(M.piperita Linn.)MpL6OH蛋白和留蘭香(M.spicata Linn.)MsL6OH蛋白的氨基酸序列高度相似,均具有細胞色素P450的血紅素結合區(qū);并且,MhL6OH蛋白與MpL6OH蛋白底物識別位點(SRS)的序列相似性更高,二者的SRS2、SRS3、SRS5和SRS6序列完全相同,僅分別在SRS1和SRS4序列上存在1個氨基酸差異,說明MhL6OH蛋白與MpL6OH蛋白可能具有相似的底物識別特異性。系統(tǒng)進化樹分析結果表明:薄荷與椒樣薄荷的親緣關系最近。組織表達特性分析結果顯示:MhL6OH基因的相對表達量在薄荷葉中最高,并遠高于其在莖和根中的相對表達量。原核表達分析結果顯示:MhL6OH蛋白能夠在大腸桿菌[Escherichia coli(Migula) Castellani et Chalmers]中高量表達,且其表達量隨誘導時間延長而逐漸增大。研究結果顯示:薄荷MhL6OH基因組織表達模式與其精油分布一致,MhL6OH蛋白底物識別位點的特異性可能是薄荷醇為薄荷精油主要成分的重要原因。
植物資源與環(huán)境學報雜志要求:
{1}稿件刊登時作者署名及順序以稿件為準。稿件有多位作者署名時，須征得其他作者同意，排好先后次序，投稿后不再變動。
{2}稿件文責自負，來稿請勿一稿多投。編輯可對擬用稿件作必要的修改或刪節(jié)，不同意者請在來稿中事先聲明。
{3}文題應恰當，簡明地反映文章的主題，盡量不用外文縮略語，一般不設副題，中文題名不超過20個漢字，英文題名應與中文題名含義一致，一般不超過10個實詞，通欄居中書寫。
{4}參考文獻格式：[序號]主要責任者，文獻題名[文獻類型標識]．出版地：出版者，出版年．起止頁碼。
{5}摘要應具有獨立性和自明性，不分段，非公知公認的符號或縮寫第一次出現(xiàn)時應寫全稱。摘要全文不超過400字。
注：因版權方要求，不能公開全文，如需全文，請咨詢雜志社
